Лекция: Летальные инфекции кошек. Принципы диагностики и профилактики

В лабораторной диагностике ветеринарной клиники «Стелла» доступны: ПЦР-комплексы для выявления ДНК возбудителей, вызывающих инфекции, глистные инвазии и болезни кожи у собак и кошек, а также ПЦР-диагностика по определению пола у птиц и выявлению цирковируса птиц. Кроме этого, диагностика хламидиоза/микоплазмоза/уреаплазмоза теперь проводится путем выделения в культуре клеток, что позволяет более рационально подходить к лечению этих инфекций.

ПЦР-комплексы для собак

Стоимость каждого комплекса – от 1500 до 2000 рублей, что значительно дешевле ПЦР-диагностики, проводимой по несколько взятым возбудителям. Время исследования – 1-2 суток.

ПЦР-комплекс респираторный для собак №1 (респираторный коронавирус, вирус парагриппа, чума, стрептококк, стафилококк) – комплексный анализ для выявления инфекционных патогенов у собак с симптомами поражения верхних дыхательных путей (кашель, ринит, коньюктивит, лимфаденит, гипертермия). Актуально для щенков, подобранных на улице или взятых из приютов. Первый этап для диагностики «питомникового кашля», так как он может вызываться любым из перечисленных возбудителей.

ПЦР-комплекс респираторный для собак № 2 (аденовироз, бордетеллез, герпесвирус, хламидиоз, микоплазмоз) – диагностический комплекс на выявление патогенов, наиболее часто вызывающих воспаление верхних дыхательных путей и коньюктивы. Является вторым этапом для диагностики «питомникового кашля», при условии получения отрицательного анализа по комплексу № 1.

ПЦР-комплекс для собак № 3 вирусный (парвовирус, коронавирус, ротавирус, чума, боррелиоз) – этот вид исследования предпочтителен для собак, особенно щенков, с симптомами поражения желудочно-кишечного тракта – диарея, рвота, повышенная температура, резкое исхудание, артрит. Парвовирус и коронавирус

ПЦР-комплекс для собак № 4 инфекции, поражающие печень (токсоплазмоз, бабезиоз, инфекционный гепатит, лептоспироз, гемобартонеллез) – анализ проводится собакам, у которых присутствуют признаки поражения печени – анемия, рвота, диарея, желтушность сдизистых оболочек, признаки гепатомегалии на УЗИ.

ПЦР-комплекс для собак № 5 клещевые инфекции (эрлихиоз 1 тип, тейлериоз, бабезиоз, анаплазмоз) – анализ проводится собакам, у которых в анамнезе присутствуют укусы клещей, анемия невыясненной этиологии, гепатит.

ПЦР-комплекс для собак № 6 клещевые инфекции (гепатозооноз, эрлихиоз тип 2, бартонеллез, боррелиоз – болезнь Лайма) – анализ проводится собакам, у которых в анамнезе присутствуют укусы клещей, анемия невыясненной этиологии, артрит (полиартрит), гепатит, а также вторым этапом после комплекса № 5, когда не удается выяснить причину анемии.

ПЦР-комплексы для кошек

ПЦР-комплекс респираторный для кошек №1 (аденовирус, токсоплазмоз, ринотрахеит, хламидиоз, микоплазмоз) – необходим для выявления патогена, вызывающего конъюктивит, ринит (слезотечение, чихание, кашель). Эти инфекции наиболее часто встречаются у кошек, приобретенных в питомниках и подобранных на улице. При выявлении микоплазмы рекомендуется дополнительно сдать анализ на определение чувствительности к антибиотикам.

ПЦР-комплекс урогенитальный для кошек № 2 (уреаплазмоз, токсоплазмоз, хламидиоз, микоплазмоз, цитомегаловирус) – рекомендуется обследовать кошку перед вязкой, а также кота, во избежание внутриутробного инфицирования плодов. Также обследуется кошка, если вязки были неудачными или ветврач диагностирует цистит, пиометру.

ПЦР-комплекс для кошек № 3 вирусный (иммунодефицит, инфекционный перитонит, лейкемия, гемобартонеллез, панлейкопения) – данный вид комплексного обследования желательно проводить породистым кошкам – британцам и шотландцам, аббисинцам, персидским породам. Но не забываем и про домашних кошек! В каком случае? Если наблюдается диарея неясной этиологии, истощение, анемия, гингивит, дерматит, увеличение объема живота. Очень часто встречается одновременно несколько инфекций.

ПЦР-комплекс для кошек № 4 инфекции слизистых оболочек (вирус паппиломы тип 1 и 2, вирус саркомы, стрептококк и стафилококк) – для диагностики берется смыв, если у кошки образовались паппиломы, язвы или опухоли в ротовой полости (если ветврачом исключена калицивирусная инфекция или терминальная стадия почечной недостаточности).

Общие комплексы для собак и кошек:

ПЦР-комплекс для обнаружения микрофлоры, вызывающей пародонтит (трепонема, актинобациллы, порфирономас гингивалис и другие)– стоматолог может назначить этот вид диагностики, если обнаруживает у животного чрезмерное отложение зубного налета, стоматит, пародонтит, кариес, расшатывание зубов. Выделение возбудителя позволяет правильно назначить лечение и подобрать антибиотики.

ПЦР-комплекс для выявления бактериальной микрофлоры кожи (золотистый стафилококк, стрептококк, кишечная палочка, протей мирабилис) – актуален при дерматитах собак и кошек, хорьков, когда животное длительно страдает и ситуация не позволяет ждать результатов бакпосева.

ПЦР-комплекс для выявления дерматофитов кожи (эпидермофития, трихофития, микроспория, малассезия) – перечисленные грибы являются самыми часто встречающимися патогенами, вызывающими грибковые инфекции кожи (стригущий лишай, атопический дерматит, наружный отит и межпальцевый дерматит). Необходима очень точная дифференциация с помощью ПЦР-диагностики, так как обычный мазок не всегда позволяет это сделать.

ПЦР-комплекс для выявления гельминтов (анкилостомоз, токсокароз, криптоспоридиоз, описторхоз) – очень часто у щенков и котят глистные инвазии протекают скрыто. Животное здорово на вид, хорошо кушает. Яйца гельминтов не всегда выделяются с калом. Поэтому обычный анализ на яйцеглист иногда оказывается ложноотрицательным. В данном случае лучше проводить ПЦР-исследование на наличие гельминтов.

ПЦР- это полимеразная цепная реакция, основанная на принципе копирования определенного участка нити ДНК. За счет многократного увеличения в объеме ДНК-материала, становится возможным обнаружить в микроскопе искомые бактерии. Преимуществом ПЦР является:

высокая чувствительность;
высокая специфичность;
выявление острых и латентных инфекций;
возможность выявления любого из ныне известных возбудителей.

ПЦР в ветеринарии

В настоящее время метод ПЦР диагностики нашел широкое применение в ветеринарии. Данный метод исследования позволяет в короткие сроки получить достоверный ответ. К тому же для его проведения необходимо очень малое количество биологического материала, в отличии, например, от общего анализа крови, что существенно упрощает работу ветеринарным врачам. Как у людей, так и у животных материалом для постановки ПЦР могут быть:

кровь и ее компоненты;
моча;
биоптат желудка;
слюна;
соскобы эпителиальных клеток.

Проведение ПЦР-диагностики кошкам

Во время обследования кошки ветеринаром, для подтверждения или опровержения предполагаемого диагноза может возникнуть необходимость сделать анализ кошке на ПЦР. Причиной назначения такого исследования могут быть наиболее часто встречающиеся и в тоже время трудно диагностируемые заболевания, такие как перитонит, ринотрахеит, коронавирус, токсоплазмоз и др.

Особо тяжелым заболеванием, при котором необходим ПЦР-метод является вирусный иммунодефицит кошек. Этот вирус поражает не только иммунную, но и нервную системы животного. Организм кошки становится ослабленным и беззащитным перед бактериями и вирусами, в результате чего животное погибает от вторичных инфекций. И дабы исключить наличие этого вируса, ветеринарный врач рекомендует проводить кошке полимеразную цепную реакцию.

Данный метод, помимо многообразия преимуществ, имеет ряд недостатков. Все аппараты для ПЦР-диагностики очень чувствительны, и поэтому малейшее его загрязнение может дать ложный положительный ответ. Так же не маловажной считается дороговизна оборудования и реактивов, поэтому не каждая ветклиника в Москве может его приобрести. Однако, диагностика заболеваний без этого метода становится все более затруднительной, поэтому проведение анализа ПЦР у кошек в Москве можно сделать в нашей клинике обратившись по контактным телефонам, или оставив заявку на сайте.

Коронавирусные инфекции кошек и собак вызываются представителями рода Coronavirus (семейство Coronaviridae). Основным проявлением коронавирусной инфекции у собак является диарея. V кошек коронавирусы вызывают энтериты и инфекционный перитонит, широко распространенные среди диких и домашних кошек.

Возбудителем коронавирусной инфекции у собак является Canine coronavirus, вызывающий острый коронавирусный энтерит. Заболевание передается при непосредственном контакте с носителем вируса (через слюну и фекалии). Данной инфекции подвержены собаки любого возраста, однако чаще всего поражаются щенки и ослабленные животные, которые уже перенесли другую болезнь, например парвовирусную инфекцию.

Основные симптомы заболевания - рвота и диарея, иногда с примесью крови, обезвоживание организма, потеря в весе, апатия. Через 3-4 недели после выздоровления может развиться повторное заболевание. При проведении диагностики коронавирусный энтерит собак необходимо дифференцировать от парвовирусного энтерита, аденовирусной инфекции кишечного типа и чумы плотоядных.

Коронавирусы, поражающие кошек, представлены двумя биотипами: FECV, или коронавирус энтерита кошек, и FIPV - вирус инфекционного перитонита кошек (2, 3). Носителями FECV является 16-50% домашних кошек, у которых вирус локализуется в тонком кишечнике, не вызывая заболевания или становясь причиной легкой диареи. В то же время у 5-12% носителей может наблюдаться мутация условно-патогенной кишечной формы FECV в патогенную (FIPV), что приводит к развитию болезни (2).

Инфекционный перитонит (ИП, FIP) кошек, заканчивающийся, как правило, летально, протекает в двух формах - влажной и сухой. Влажная (экссудативная) форма ИП характеризуется поражением кровеносных сосудов брюшной или грудной полостей, сопровождающимся выпотеванием плазмы в указанные полости (рис. 1). У больных животных, развивается асцит (рис. 2), а в случае скопления жидкости - нарушение функции дыхания. На серозных покровах органов брюшной полости формируются фибринозные наложения (рис. 3), в дальнейшем могут образовываться спайки. Вследствие нарушения функции печени наблюдается эктеричность склер и кожных покровов.

Сухая (неэкссудативная) форма ИП протекает без скопления жидкости в брюшной и грудной полостях. В этом случае страдают внутренние органы - головной мозг (рис. 4), печень, почки, поджелудочная железа, в 25% случаев наблюдаются поражения глаз (рис. 5) (5).

Поскольку эффективная схема лечения ИП пока не разработана, первостепенное значение имеют профилактические меры, направленные на раннее выявление вирусоносительства (1, 3).

Диагностика инфекционного перитонита кошек также представляет серьезную проблему. Традиционные методы выявления возбудителя, основанные на обнаружении антител к коронавирусам (РНГАи ИФА), дают до 60% ложноположительных результатов. Это обусловлено присутствием в кишечнике кошек условно-патогенных штаммов возбудителя (2, 3). В ряде зарубежных лабораторий применяется комплексная методика диагностики ИП, включающая определение:
- титра антител к коронавирусу;
- соотношения альбуминов/глобулинов в транссудате или плазме крови;
- уровня а-1 кислого гликопро-теина (AGP);
- цитологических и гематологических показателей (4).

Материалы и методы
В исследовании был использован штамм коронавируса «Багира» (5 1оg ТЦД50/мл) в разведениях, 8 изолятов коронавирусов кошек (FCoV), 2 изолята коронавируса собак (CCV) и суспензии вируса панлейкопении кошек и калицивируса кошек.
При испытании ПЦР-тест-системы использовался биологический материал здоровых кошек, животных с клиническими признаками ИП и кошек с неспецифическими симптомами. Среди исследованных животных были как содержащиеся в питомниках, так и находящиеся на индивидуальном содержании.
Биологический материал параллельно исследовался методами ПЦР и РИГА. С помощью ПЦР-системы исследовались фекалии, плазма крови, транссудат при специфическом асците, а методом РИГА - сыворотка крови и транссудат.

Серологические тесты проводились с использованием набора для выявления антител к коронавирусам плотоядных в РИГА (ТУ 9388-025-00494189-01). Биологический материал собак исследовался методом ПЦР.

Однако данное исследование требует значительных затрат времени и средств. В связи с этим эффективным методом диагностики ИП может служить полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет не только выявлять коронавирусы кошек, но и проводить дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов исходя из различной локализации их в организме. При этом обнаружение вируса в фекалиях кошек свидетельствует о носительстве условно-патогенных штаммов (FECV), а в плазме крови или асцитной жидкости - о циркуляции в организме животного патогенных штаммов (FIPV) и, следовательно, о заболевании.

Цель настоящего исследования - испытание тест-системы для диагностики коронавирусной инфекции у кошек и собак на основе ПЦР.

Выделение РНК проводилось с использованием набора «РНК-сорб» (ЦНИИЭ), в основе которого лежит метод ее сорбции на силикагеле. ПЦР проводилась на амплификаторе ТЕРЦИК («ДНК-технология») по стандартной методике. Полученные ПЦР-продукты визуализировались методом электрофореза в 1,5% агарозном геле, содержащем бромистый этидий.

Результаты и обсуждение
В процессе исследования проведен анализ сведений о нуклеотидных последовательностях представителей семейства Coronaviridae, в частности различных изолятов коронавирусов кошек и собак, опубликованных в базах данных Entrez, GeneBank, EMBL и DDBJ. Кроме того, изучена литература, характеризующая структуру геномов FCoV, CCV и их генетическое родство с другими представителями семейства.

В качестве мишеней для специфических праймеров были выбраны две консервативные последовательности в гене нуклеокапсидного протеина. Специфичность предложенных праймеров изучалась с помощью компьютерных программ FASTA и BLASTA. В результате проведенной работы была выявлена гомология выбранных олигонуклеотидов только с генами нуклеокапсидного протеина FCoV и CCV и не обнаружено их значимой гомологии с нуклеотидными последовательностями иных видов семейства Coronaviridae, а также каких-либо других вирусов, бактерий или эукариот. Таким образом, предложенные праймеры, исходя из теоретических расчетов, должны обладать 100% специфичностью.

На следующем этапе исследования были оптимизированы условия выделения РНК вируса и проведения реакции обратной транскрипции и ПЦР, а также определены специфичность и чувствительность ПЦР-анализа. Размер ПЦР-продукта составил 350 пар нуклеотидов. Метод показал 100% специфичность и высокую чувствительность. Обнаружение коронавируса в фекалиях кошек свидетельствовало о носительстве его условно-патогенных штаммов в кишечнике, обнаружение FECV в транссудате и плазме крови - о развитии заболевания.

При исследовании методом РНГА положительным результатом считалось обнаружение у животного титра антител > 1:128. Однако это могло указывать как на вирусоносительство, так и на манифестированную форму инфекции. Кроме того, положительный титр мог быть обусловлен наличием контакта с коронавирусом ранее. В качестве материала от собак исследовались фекалии, и обнаружение в них РНК коронавируса свидетельствовало о заболевании, вызванном CCV.

В ходе эксперимента был исследован биологический материал, взятый у 193 кошек (таблица). Методом РНГА положительный результат был зафиксирован у 131 животного (титры антител > 1:128). При тестировании «сероположительных» кошек методом ПЦР РНК коронавируса была обнаружена в плазме и асцитной жидкости у 12 животных (9%), только в фекалиях - у 68 (52%) и у 51 (39%) - не обнаружена вовсе. Таким образом, 52% кошек с серопозитивным результатом являлись носителями условно-патогенных штаммов коронавируса, а 39% были здоровы. Очевидно, что исследование методом РНГА дало 63% ложноположительньгх результатов (в пересчете на общее количество исследованных животных).

Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что диагностика коронавирусной инфекции кошек традиционным серологическим методом (РНГА) дает более 60% ложноположительных результатов, поскольку не позволяет дифференцировать состояние носительства от истинного заболевания. Кроме того, "сероположительными» считались животные, имевшие контакт с коронавирусом ранее.

Использование метода ПЦР позволило провести дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов в связи с их раз личной локализацией в организме и отличить состояние носительства от заболевания. Таким образом, данные проведенного исследования говорят о целесообразности использования метода ПЦР для выявления коронавирусов кошек и собак и постановки окончательного диагноза.

В соответствии с приказом № 45 Департамента ветеринарии МСХ РФ в период с 03.08.2004 г. по 06.08.2004 г. были проведены комиссионные испытания тест-системы для диагностики инфекционного перитонита кошек методом ПЦР. Тест-система успешно прошла комиссионную апробацию, показав 100% специфичность и высокую чувствительность в рамках предложенной панели. В настоящее время тест-система «Коронавир» для выявления и идентификации коронавирусов кошек и собак, основанная на ПЦР, успешно используется в ветеринарной практике (ТУ 9388-142-00494189-05; РУ № Р077-1-3.5-0813 зарегистрирована в РФ за № ПВР-1-3.5/01556 от 30.06.06 г. сроком на 5 лет).

ЛИТЕРАТУРА
1, Addie, D, D„ Jarrett, 0. Use of a reverse- transcriptase polymerase chain reaction for monitoring the shedding of feline coronavirus by healthy cats, Vet. Rec, 2001, May 26; 148 (21): 649-53,
2, Vennema, H, atal. Feline Infectious Peritonitis Viruses Arise by Mutation from Endemic Feline Enteric Coronaviruses, Virology, 1998:150-157.
3, Herrewegh, A.A., Mahler, M„ Hedrich, H.J., Haagmans, B.L Egberink, H.F., Horzinek, M.C., Rottier, P.J., de Groot, R,J, Persistence and evolution of feline coronavirus in a closed cat-breeding colony Virology 1997, Aug 4; 234 (2): 349-363,
4, Comparison of Different Tests to Diagnose Feline Infectious Peritonitis; Katrin Hartmann at al„ 2003.
5, Feline infectious peritonitis; Stacy E, Andrew, Veterinary clinics of North America: small animal; vol. 30, number 5, September 2000

Е.А. ЯРАЛОВА, И.Л. ОБУХОВ, ММ РАХМАНИНА, Э.И. ЭЛИЗБАРАШВИЛИ, В.И.УЛАСОВ,
Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, г. Москва

Инфекционный перитонит кошек – системная вирусная болезнь (Coronavirus) , которая поражает многие ткани организма. Определены две формы болезни: влажная и сухая. При влажной форме, воспалительная жидкость аккумулируется в абдоминальной полости. При сухой форме, вирус атакует различные органы, такие как почки и селезенка. Нет лечения для данной болезни и почти всегда исход фатальный. ИПК наиболее часто диагностируется у котят и взрослых кошек до 3х лет. Кошки в питомниках или в домах с несколькими животными имеют наивысший риск развития болезни.

Дополнительная информация
ИПК системная вирусная болезнь, характеризующаяся скрытым началом, периодической неконтролируемой лихорадкой, пиогранулематозной реакцией, аккумулирование экссудата в полостях тела, высокой смертностью.

Патофизиология
Вирус ИПК реплицируется локально в эпителиальных клетках респираторного тракта или орофарингса. Вирусные тела начинают вырабатываться, и вирус поглощается макрофагами. Вирус транспортируется макрофагами/моноцитами по организму, локализуясь в стенках различных вен и периваскулярного пространства. Локальная периваскулярная репликация вируса и последующая пиогранулематозная реакция со стороны тканей образует характерную картину поражения при ИПК.

Поражаемые системы

Мультисистемная – пиогранулематозные или гранулематозные повреждения происходит в сальнике, на серозных оболочках органов брюшной полости, таких как печень, почки, кишечник, в абдоминальных лимфатических узлах, и подслизистом слое кишечника.
Респираторная – поражения на поверхности легких, плевральный выпот при влажной форме ИПК.
Нервная – васкулярные поражения проявляются на всем протяжении ЦНС, особенно, на оболочках
Офтальмологическая – повреждения могут проявляться увеитом и хореоретинитом.

Генетическая предрасположенность
Нет.

Распространенность
Распространенность антител против коронавируса кошек (вируса ИПК, КВК, FCoV) высокая в большинстве популяций, особенно там, где много кошек содержится совместно. Инциденты клинического проявления болезни низки в большинстве популяций, особенно у кошек, которые содержаться одни. Из-за трудности в диагностике, контроле и профилактики вспышка ИПК в гостиницах для кошек может стать катастрофой.

Признаки инфекционного,вирусного перитонита кошек (ИПК, ВИПК, FIP)

Домашние кошки и экзотические кошки предрасположены к инфекции ВИПК.

Породная предрасположенность
Некоторые семьи или линии кошек проявляют большую предрасположенность к развитию клинической формы болезни после инфицирования ВИПК. Среди экзотических кошек, гепарды особенно предрасположены к развитию фатального ИПК.

Средний возраст и диапазон
Высокая распространенность ВИПК проявляется у котят в 3 мес. до 3 лет. Распространенность снижается после достижения кошкой 3 лет.

Половая предрасположенность
Нет

Анамнез
Общие комментарии
Широкий диапазон признаков может проявиться в зависимости от вирулентности и патогенности штамма вируса вовлеченного в процесс, эффективности иммунной системы хозяина и поражаемых систем. Различают две классические формы болезни, влажная, с выпотом экссудатов в полости тела и сухая, которая поражает различные органы.
Анамнез

Имеется скрытое начало
Постепенное истощение снижение аппетита
Остановка в росте
Постепенное увеличение объема живота, развитие водянки, асцита, пузатый вид животного
Постоянная лихорадка без ответа на антибиотики

Результаты физикального обследования

Депрессия, низкорослость
Плохое общее состояние – потеря веса и плохое состояние шерсти
Абдоминальные и плевральные выпоты
Пальпация может выявить абдоминальные массы (гранулемы или пиогранулемы) на сальнике, на поверхности внутренних органов, особенно почек, и на кишечных стенках. Мезентеральные лимфатические узлы могут быть увеличены.
Глаза: , изменение цвета радужки, неправильная форма зрачка.
Неврологические признаки могут включать различные варианты.

Причины
ВИПК вызывается одним из двух типов коронавируса кошачьих. Большинство инфекций, возможно 85%,вызываются типом 1 вируса (FCoV-1), остальные типом 2 (FCoV-2). Очень важно проводить различие между двумя биотипами вируса, менее вирулентные и авирулентные кишечные виды вируса (кишечный коронавирус кошек или КККВ) и вирулентными видами, которые приводят к возникновению ВИПК. В действительности, ВВВК и в ВИПК могут становиться как типом 1 так и типом 2. В каждом типе есть спектр вирулентности из авирулентных вирусов, которые образуют асимптоматические инфекции и фатальное поражение ВИПК.

Факторы риска

Вступление FCoV-антителпозитивныной кошки в популяцию FCoV-антителнегативных кошек (незащищенных антителами против ВИПК)
Кошки, содержащиеся группами

Диагностика ВИПК

Влажная форма ВИПК может быть легко выявлена клиническим путем, тогда как сухую форму сложно точно диагностировать. Нет ни одного лабораторного теста для диагностики ВИПК, потому что болезнь вариабельно от случая к случаю.

Дифференциальный диагноз

Лихорадка неизвестного происхождения. Этот диагноз можно поставить когда отвергнуты все другие возможные причины гипертермии.
Болезни сердца вызывающие плевральный выпот. Это выпот буде иметь низкую относительную плотность и количество клеток в сравнении с высокой плотностью и огромным содержанием клеток при ВИПК выпоте.
Повреждения при лимфоме, особенно почек, могут быть сходными с ВИПК при пальпации. Опухоли ЦНС могут проявлять признаки подобные тем, что и при ВИПК. Большинство кошек с позитивным тестом на ВИПК-антиген. У кошек с негативным результатом теста, биопсия мест поражения (при возможности) должны подвергаться гистопатологическому или иммунохимическому анализу на ВИПК-антиген.
Респираторные болезни, вызываемые калицивирусом кошек и герпесвирусом кошек, хламидиями или различными бактериями.
Панстеатит (болезнь желтого жира). Боль при пальпации живота, и диета только из рыбы.
Панлейкопения, вызывающая энтерит. Количество лейкоцитов должно быть низким.
Диагноз
Это заболевание подозревается при отсутствии ответа лихорадки на введение антибиотиков, наличию экссудатов в грудной и перитонеальной полостях без явных инфекционных агентов, гиперглобулинемии и повышенным содержанием белка в выпоте при влажной форме.
Сердечная недостаточность, лимфосаркома и разрыв лимфатических протоков и т.п. болезни с признаками выпота в грудную и брюшную полости должны быть внимательно учтены и проверены, как и лейкемия кошек, вирусный иммунодефицит кошек и панлейкопения кошек.
По различным причинам изоляция вируса не практична.
Серологические процедуры: некоторые диагностические лаборатории не могут проводить тесты на ВИПК из-за сложности интерпретации результатов. ВИПК позитивный результат иммунофлуорересцентного анализа (ИФА) говорит лишь только о том, что животное имело контакт с вирусом, не подтверждая наличия вируса. Однако, существует насколько свидетельств что многие серологически позитивные кошки избавились от коронавируса возможно в респираторном или желудочно-кишечном тракте. Положительные тесты с использованием ИФА или ELISA не дают гарантированного диагноза на ВИПК.
Позитивный результат теста ИФА на ВИПК (титр 1:50 до 1:6000) вместе с клиническими признаками ВИПК говорит о верном проявлении ВИПК. Хотя и необычно, но некоторые кошки с проявлением признаков ВИПК имеют отрицательный результат на серологическое исследование.

ИФА (иммуноферментный анализ)предпочитается многими диагностическими лабораториями, чем ELISA.

Диагностические наборы для ИФА и ELISA диагностики доступны для использования на коронавирус кошек, но результаты необходимо интерпретировать с осторожностью.
Общий белок, определяемый электрофорезом, заметно повышен.
Позитивный результат окрашивания образцов (из легких, печени, почек, лимфатических узлов брыжейки и плевры) специфическими флуоресцирующими антителами на ВИПК считается окончательным диагнозом. Кишечный коронавирус перекрестно реагирует на тест к ВИПК.
При жизни у животных в крови можно обнаружить тяжелую анемию, нейтрофилию и лейкопению.
Так же коммерчески доступно ПРЦ исследование для оказания помощи в идентификации вируса в различных тканях.

Анализы крови и мочи

Кошки с ВИПК имеют тенденцию к развитию лейкопении на ранней стадии инфекции, но позднее развивается лейкоцитоз с нейтрофилией и лимфопенией.
Может выявляться анемия различной степени тяжести – от средней до тяжелой.
Обычно заметно повышение уровня общего плазменного глобулина.
Часто присутствует и гипербилирубиурия.

Лабораторные тесты

Тест на сывороточные антитела определяют антитела против коронавирусов кошек. Позитивный результат не является диагностическим, и предпочтительнее показывает предыдущую инфекцию ВИПК. Корреляция между верхним значением титра и потенциального подтверждения ВИПК не велико.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) позволяет определить вирусный антиген. Точность позитивного теста коррелирует с клиническим проявлением болезни.
Иммуногистохимическое исследование (иммунопероксидазой) доступно для определения ВИПК антигена в определенных клетках в гистопатологических образцах кошек при посмертном исследовании с фатальной формой болезни и образцах биопсии. Это тест является прекрасным для подтверждения ВИПК.

Визуальные методы диагностики обычно не требуются, но могут помочь в обнаружении абдоминально и плеврального выпота, а также пиогранулематозных повреждений.
Жидкость при влажной форме ВИПК также может обнаруживаться и в брюшной полости (асцит).
УЗИ дает дополнительную информацию, которую нельзя получить при помощи рентгенографии. В данном случае, увеличенные лимфатические узлы в центре кишечника.

Рентгенограмма: 1 . Диффузное затемнение в нижней части грудной клетки из-за плеврального выпота, из-за чего границы сердца 2 не видны, а легкие 4 сдвинуты к позвоночнику и мало вентилируются, 3 – трахея, 5 – печень, 6 – желудок, 7 – кишечник

Другие диагностические процедуры

Жидкость, полученная из грудной и брюшной полостей, бледного или соломенного цвета, тягучая, часто с вкраплениями фибрина, а после отстаивания в ней оседают сгустки. Специфическая плотность такой жидкости обычно высокая (1.030-1.040).
Лапароскопия может быть полезной для обнаружения специфических повреждений в брюшной полости и получения образцов тканей для гистопатологического и иммунохимического подтверждения.
Диагностическая лапаротомия может выявить истину, если есть трудность в постановке диагноза и если лапароскопия недоступна.

Внешние и гистопатологические изменения

Мониторинг за пациентом
У кошки с ВИПК необходимо контролировать скопление экссудата в плевральной полости.

Профилактика

Имеется в продаже MLV интраназальная вакцина против ВИПК. Однако, эффективность дано вакцины низкая, следовательно на ней нельзя целиком полагаться в вопросе контроля ВИПК.
Главный способ передачи ВИПК – от кошек асимптоматических вирусоносителей котятам в возрасте 5-7 недель, когда колостральный иммунитет начнет ослабевать. Следовательно, ранний отъем котят в возрасте 4-5 недель с выращиванием котят изолированных от прямого контакта с другими кошками включая матерей, прервет цикл передачи вируса от матери к потомству.
Обычная дезинфекция мест обитания кошки и средств по уходу и кормлению быстро инактивирует вирус и уменьшает риск передачи от кошки к кошке.
Только FCoV- антител негативные кошки должны вводиться в питомник или колонию кошек как гарантия свободы организма от вируса. Вакцинация может делать кошек антител-позитивными и может затруднить контроль вируса в популяции.

Возможные осложнения
При плевральном выпоте необходим торакоцентез, как средство лечения.

Ожидаемый курс и прогноз
ВИПК может запустить проявление клинических признаков в течение нескольких дней или нескольких месяцев. Прогноз смертельный после проявления типичных признаков ВИПК инфекции, достигая 100% смертности.

Клинические признаки, типично проявляющиеся при данной болезни.

Снижения вольтажа на ЭКГ, затухание комплексов и низкая амплитуда.
Приглушение сердечных тонов
Тахикардия, учащение пульса
Растяжение брюшной полости
Анорексия, сокращение или потеря аппетита
Асцит
Снижение объема фекалий, запор, отсутствие фекалий
Диарея
Дисфагия
Гепатоспленомегалия, спленомегалия, гепатомегалия
Полифагия, избыточный аппетит
Аномальное проприорецептивное позиционирование
Атаксия, дискоординация, падание
Цианоз
Дегидратация
Дисметрия, гиперметрия, гипометрия
Непереносимость физической нагрузки
Лихорадка
Хромота передних конечностей
Генерализованная диагностика
Генерализованная слабость
Слабость в области головы, шеи, парез, паралич
Гемипарез
Хромота задних конечностей
Массы в брюшной полости
Недостаток роста
Лимфаденопатия
Опистотонус
Бледность кожи и слизистых оболочек
Полидипсия
Припухлость в области препуция, семенников, пениса, мошонки
Тетрапарез, слабость, паралич 4х конечностей
Дрожь, тремор, фасцикуляция
Потеря веса
Аномальное поведение, агрессия, изменение привычек
Аномальные рефлексы передних конечностей, усиление или уменьшение
Аномальные рефлексы задних конечностей, усиление или уменьшение
Кружение
Дезориентация, потеря памяти
Тупоумие, депрессия, летаргия
Делириум, бред, мания, возбуждение
Гипоэстезия передних конечностей, анестезия
Наклон головы

Гиперестезия, гиперактивность
Гипертония мышц, миотония
Гипотония мышц
Пропульсия, бесцельное брожение
Судороги или обмороки, конвульсии, коллапс
Тремор
Аномальный рефлекс зрачка на свет
Аномальная рефлективность сетчатки
Аномальный размер сосудов сетчатки
Анизокория
Блефароспазм
Слепота
Хемоз, отек конъюнктивы, роговицы
Аномальная васкуляризация конъюнктивы и роговицы
Краснота конъюнктивы, роговицы
Отек роговицы
Паннус
Гифема, «черный глаз»
Гипопион
Слезотечение
Миоз, сокращение зрачка
Мидриаз, расширение зрачка
Нистагм
Помутнение стекловидного тела
Атрофия зрительного нерва, сокращение размеров зрительного нерва
Гнойные истечения из глаз
Отслоение клетчатки
Складки и бугры на сетчатки
Кровоизлияния сетчатки
Синехии
Боль спины
Боль шеи
Боль от внешнего давления на брюшную полость
Аномальный размер семенников
Кашель
Притухание легочных звуков
Диспноэ
Тахипноэ
Слизистые носовые истечения, серозные, водянистые
Гнойные носовые истечения
Грубость и неопрятность шерсти
Глюкозурия
Кетонурия
Полиурия

Лечение

В зависимости от тяжести протекания болезни животное должно проходить лечение либо стационарно или амбулаторно, желания и возможности владельцев обеспечить хорошее поддерживающее лечение.

Активность
Активность животного необходимо сократить для уменьшения распространения вируса к другим кошкам.

Диета
Анорексия и потеря веса – лавные проблемы при ВИПК. Любая диета, которая побудит животное к приему пищи, приветствуется.

Обучение владельцев
Обсудите различные аспекты ВИПК. Включая фатальный прогноз при окончальтеной постановке диагноза.

Хирургические аспекты
Нет

Лекарственные препараты

Нет препаратов для эффективного лечение ВИПК. Кошки с генерализованной инфекцией ВИПК почти всегда погибают.
Иммуносупрессивные препараты, такие как преднизолон и циклофосфамид применяются с ограниченным успехом. Кортикостероиды как субконъюнктивальные инъекции эффективны только при офтальмологическом проявлении болезни.
Интерфероны, хотя и эффективны in vitro, имеют ограниченный успех в лечении ВИПК. Рекомбинантный интерферон по оценкам имел некоторый успех в лечении ВИПК в Японии.
Антибиотики не эффективны, поскольку вторичные бактериальные инфекции не являются частью клинического проявления болезни.

Противопоказания
Нет

Предостережения
Нет

Возможные взаимодействия
Нет

Альтернативные препараты
Нет эффективных противовирусных лекарств против ВИПК.

Прогноз
ВИПК проходит клиническое проявление в течение нескольких дней до нескольких месяцев. Прогноз смертельный при проявлении характерных клинических признаков, смертность 100%.

I. Какие анализы надо сдать подобранной на улице кошке или коту?

Строго говоря, назначать исследования должен лечащий врач в зависимости от состояния животного, но грамотный специалист все равно назначит какую-нибудь комбинацию из списка, приведенного ниже. Сдавать анализы я рекомендую даже совершенно здоровым на вид животным. Почему, станет ясно по ходу прочтения этой статьи. А вот у котят до 2-х месяцев брать кровь на анализы, в том числе для проверки на инфекции нет смысла.

Расположим анализы по приоритету:

На панлейкопению (методом ПЦР).
На вялотекущие вирусные инфекции (методом ПЦР).
Общеклинический анализ крови (перед сдачей требуется голодание 4 часа)
Биохимический анализ крови (перед сдачей требуется голодание 8-12 часов).
Анализ мочи. (общеклинический, а также соотношение белок-креатинин).

Рассмотрим подробнее:

Панлейкопения или чума кошек (парвовирусная инфекция). Самое заразное и смертоносное заболевание кошек. Не передается людям и другим видам животных. При отсутствии лечения часто приводит к смерти, особенно котят. Вакцинация импортным препаратом, ежегодно проводимая по всем правилам (с двойной дегельминтизацией) эффективно защищает от этой болезни. Поэтому, если у Вас дома есть непривитые кошки, то анализ крайне важен. Но даже если у Вас дома нет других кошек или они привиты — я все равно настоятельно рекомендую сдать этот анализ.

Даже совершенно здоровое на вид животное может быть носителем этого опаснейшего вируса (инкубационный период составляет от 4-х до 21 дня) и если анализ обнаружит вирус, врачи смогут предпринять соответствующие меры, чтобы смягчить протекание болезни. Пока результат не получен, рекомендую соблюдать .

Анализы на вялотекущие инфекции. Наиболее распространены 4 инфекции: вирусный лейкоз кошек, иммунодефицит кошек, вирусный перитонит кошек (ФИП) и коронавирус (вирусный энтерит). Не передаются человеку и другим видам животных. Сдача анализов крайне необходима, если у вас есть свои кошки (причем неважно, привиты они или нет, т.к. эффективных прививок от этих вирусов не существует). Если других кошек в квартире нет, то все равно желательно знать о наличии вируса в теле животного т.к. эти инфекции могут “дремать” годами без каких-либо видимых проявлений, но активизироваться в случае стрессового воздействия на организм (от сильного глистогонного препарата до наркоза при операции) и перейти в острую стадию. Эффективного лечения лейкоза, иммунодефицита и ФИП в острой стадии нет. Существует поддерживающая терапия, но и она не всегда эффективна. Пока результат не получен, рекомендую соблюдать .

Стоимость анализа методом ПЦР (рекомендую только этот метод) 300-600руб без учета стоимости забора крови за каждый (мазка из прямой кишки), в зависимости от лаборатории или клиники. Результат через 1-3 суток, также в зависимости от лаборатории. Некоторые лаборатории объединяют эти анализы в один т.н. профиль, что дает возможность сэкономить деньги. Например, лаборатория Нуклеом, через ветклинику Зооакадемия, предоставляет возможность сдать анализы на вялотекущие инфекции методом ПЦР в составе профиля за 900руб (причем туда НЕ входит, коронавирус, который рекомендуется сдать дополнительно за 300р, зато включена панлейкопения (!) и добавлен гемобартонеллез). На сегодняшний день, это самое выгодное из известных мне предложений по Москве. В других лабораториях и ветклиниках подобное исследование может обойтись в 2 раза дороже.

Общеклинический анализ крови. Перед сдачей необходимо голодание 4 часа. Очень информативен для врачей. Расскажет об острых состояниях, например, о воспалительных процессах в организме, и поможет врачу правильно подобрать препараты для лечения, если возникнет необходимость. Подтвердить или опровергнуть результаты исследований №1-2. При этом стоит недорого 300-600руб (без учета стоимости забора крови), поэтому строго рекомендуется к сдаче, при любом заборе крови, например, для исследований №1-2.

Биохимическое исследование крови. Перед сдачей необходимо голодание 8-12 часов. Покажет состояние внутренних органов и поможет врачу назначить правильное лечение при необходимости. Также как и исследование №3 анализ может помочь в подтверждении результатов исследований №2. Представляет собой набор показателей, поэтому стоимость варьируется в зависимости от их количества и от лаборатории. Как правило, нет необходимости ломать голову на тему, какие показатели сдавать т.к. любая лаборатория объединяет их в специальные профили. Можно сдать стандартный или расширенный. Стоимость варьируется в зависимости от клиники и лаборатории. Стандартный профиль стоит от 900р, расширенный от 1 200р без учета стоимости забора крови.

Важное замечание. Нет смысла сдавать биохимию крови: а) беременным, б) котятам до 4-х месяцев, в) ранее одного месяца после операции с наркозом! Результат будет сильно искажен и может ввести в заблуждение врача, который назначит ненужное лечение.

Анализ мочи. 5.1. Общеклинический. 5.2. Соотношение белок/креатинин.

Самое сложное по части получения материала исследование. Зато для его сбора не надо вести животное в клинику. Очень важное исследование, которое может выявить на ранней стадии проблемы с почками или признаки мочекаменной болезни, чего никогда не сможет показать исследование №3. В то же время в нем нет такой срочности, как в исследованиях №1-3. Мочу необходимо собирать в чистый(!) лоток. Можно использовать специальный набор для сбора мочи (стоимость 300-400р), представляющий собой гранулы, не впитывающие жидкость, и контейнер для мочи. Для сбора мочи из лотка также можно использовать обычный шприц (20 мл) без иглы. Транспортировать в лабораторию или ветклинику можно также в нем. Необходимые соблюдать некоторые условия. Анализ не должен храниться более 5-ти часов с момента сбора до момента помещения в лабораторное оборудование. Храниться и транспортироваться он должен в холоде. При транспортировке рекомендую использовать термопакет и хладогент. Если у Вас нет хладогента, то можно использовать замороженные овощи J. Средняя стоимость — около 600р.

II. Где сдавать анализы?

А) Можно в клинике, совместив с первичным приемом врача. В любом случае Вам придется идти к врачу с результатами анализов, т.к. интерпретация анализов №3-5 требует врачебной квалификации.

Б) Напрямую в специализированных лабораториях. В этом случае Вам придется самим решать что сдавать, а что нет.

При этом, многие ветклиники имеют собственные лаборатории, способные проводить исследования №3-5, в то время как исследования на вирусы требуют более дорогостоящего оборудования, поэтому клиники, не имея его, отправляют забранный материал в специализированные лаборатории, с которыми они сотрудничают. Наиболее известные лаборатории в Москве (по алфавиту): Веттест, Неовет, Нуклеом, Пастер, ЦМД (звенигородское шоссе), Шанс био (сеть). С какими лабораториями сотрудничает конкретная ветклиника (желательно, чтобы их было более одной), а также стоимость анализов рекомендую узнавать заранее. Как правило, во всех лабораториях имеется высококачественное оборудование, но качество полученных результатов, к сожалению, сильно зависит от человеческого фактора. Так что это в какой-то степени лотерея, и порой приходится пересдавать анализы в разных лабораториях, чтобы подтвердить или опровергнуть тот или иной результат.

О правилах читайте в отдельной статье.